ECL超敏發(fā)光液使用說(shuō)明

保存條件：2－8度保存有效期12個(gè)月

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

ECL化學(xué)發(fā)光液在HRP的催化下發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而發(fā)光，可用于檢測(cè)固定在膜上的蛋白質(zhì)等生物大分子。使用照相技術(shù)（X-光膠片曝光）或者其他成像方法（如熒光或化學(xué)發(fā)光成像儀）進(jìn)行檢測(cè)。

我們的是在普通的化學(xué)發(fā)光液基礎(chǔ)之讓改進(jìn)而來(lái)，相對(duì)于普通發(fā)光液來(lái)說(shuō)，靈敏度更高，檢測(cè)下限更低，可達(dá)到pg級(jí)別的抗原，并且一抗和二抗的稀釋度更高。

本產(chǎn)品在5分鐘后光強(qiáng)達(dá)到zui大，在30分鐘時(shí)光強(qiáng)還能維持80%（以5分鐘時(shí)光強(qiáng)為基礎(chǔ)）。zui終發(fā)光時(shí)長(zhǎng)可達(dá)一小時(shí)。

操作步驟

1.在二抗孵育完畢后，將發(fā)光液從冰箱取出到室溫平衡。將印跡膜充分洗滌。

2.根據(jù)需要量，將A和B按照1：1的比例等體積混合，配制為化學(xué)發(fā)光檢測(cè)底物工作液（例如：一張8cm×6cm的膜使用2ml工作液，為節(jié)省試劑，初次實(shí)驗(yàn)可用洗滌緩沖液測(cè)試，以zui少的液體蓋住整個(gè)膜的表面）。

3.棄去洗滌緩沖液，轉(zhuǎn)移到暗室或者避光盒里操作，將發(fā)光底物工作液滴加在印跡膜上，確保工作液覆蓋整張膜，室溫孵育5分鐘。

4.去掉多余發(fā)光底物工作液，將印跡膜置于兩層干凈的塑料薄膜之間，此過(guò)程應(yīng)小心完成，避免膜與膜之間產(chǎn)生氣泡。

5.在暗室內(nèi)進(jìn)行X-光膠片曝光，或?qū)⒛し胖玫綗晒狻⒒瘜W(xué)發(fā)光成像儀內(nèi)，按照儀器說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。

6.因本產(chǎn)品發(fā)光發(fā)光超度高，發(fā)光時(shí)間長(zhǎng)，所以為得到理想的結(jié)果，可多次曝光（不同時(shí)長(zhǎng)）以得到理想的結(jié)果。

注意事項(xiàng)

1.為獲得*實(shí)驗(yàn)結(jié)果，請(qǐng)務(wù)必優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，包括檢測(cè)樣品的用量、一抗、二抗稀釋度、雜交膜及封閉試劑的選擇，并且發(fā)光液請(qǐng)現(xiàn)用現(xiàn)配。

2.建議在封閉緩沖液及所有抗體稀釋液中加入高質(zhì)量的吐溫-20（終濃度為0.05%），以減少非特異性結(jié)合。

3.由于疊氮鈉是HRP抑制劑，在緩沖液中應(yīng)避免使用疊氮鈉作為防腐劑。

4.免疫印跡實(shí)驗(yàn)進(jìn)行全過(guò)程中，請(qǐng)確保印跡膜始終處于濕潤(rùn)狀態(tài)，避免干燥。

5.在與膜發(fā)生接觸過(guò)程中請(qǐng)佩戴手套或者使用潔凈鑷子，避免蛋白污染。

6.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，請(qǐng)使用潔凈器材。保證非金屬設(shè)備沒(méi)有明顯劃痕，金屬設(shè)備表面無(wú)銹。銹可能導(dǎo)致膜上帶有污點(diǎn)或者高背景。